紫锥菊（Echinacea）的制剂工艺研究?
西南大学  药学本科  02级2班 程玉祥 指导教师  曾中良
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?摘要：采用大孔吸附树脂分离纯化紫锥菊提取物中免疫活性成分菊苣酸，7％(v／v)的甲醇一水溶液洗脱，HPLC法对产品中菊苣酸含量进行检测分析。该法能把紫锥菊提取物中菊苣酸含量(4％)提高9倍左右，回收率达到95％以上，且操作简单，可用于菊苣酸的分离纯化。
?关键词：紫锥菊   菊苣酸  制剂工艺  提取分离  大孔树脂
一.用途和发展概况
紫锥菊(Echinacea purpurea)是国际上受到普遍重视的一种免疫促进剂和免疫调节剂。菊苣酸是其重要的生理活性成分，具有抑制透明质酸酶的复制和抗HIV．1作用，使胶原质免受自由基诱导的降解等药理活性。菊苣酸含量成为紫锥菊制剂的重要质量指标[引关于菊苣酸分离分析的文献报道，主要是高效液相色谱法，应用大孔吸附树脂分离纯化紫锥菊提取物中菊苣酸的报道甚少。本文对大孔吸附树脂分离纯化菊苣酸的工艺进行了研究，结果满意，而本品为淡黄色粉末。免疫增强剂紫锥菊（Echinacea）首次进入中国市场。尤其在德国和法国，紫锥菊及其制剂已成为家庭常备药。在美国药用植物销售排名中，紫锥菊在1995，1996，1997，1999年均排名第一。紫锥菊的免疫活性受到国内外的普遍重视。如今，以紫锥菊提取物为主要原料制成的紫锥菊胶囊在上海隆重上市。据悉，上海德仁堂生物科技有限公司提供的这一时尚产品是首次进入中国市场。紫锥菊属植物制剂作为免疫促进和调节剂，在德国早在 1989年就列入2000个最常用处方中，排名131位，1982年紫锥菊单一及复合制剂的种类就达到300种之多。且有许多剂型已大量用于临床，如用于治疗病毒或细菌引起的急性和慢性呼吸道感染，辅助各种抗菌素治疗各种严重的细菌感染等。1999年美国健康食品畅销排名榜上紫锥菊已名列榜首，目前紫锥菊制剂在全球范围内还有日益普及的趋势。许多在紫锥菊中植物化学物质是积极参与其作用：多糖、黄酮、咖啡酸的衍生物、精油、多炔、烷基胺（Alkylamides）和生物碱。人们已经知道多糖类可以激发身体的细胞去对抗感染。可以从提炼物、酊剂、片剂、胶囊、药膏，而且稳定新鲜的提取物中得到。 
二.提取分离工艺
2.1 仪器与试剂
Waters 2695分离单元；Waters996二极管阵列UV检测器(Waters，美国)；恒温水浴锅(GSY—II，北京市医疗设备厂)；玻璃层析柱(Φ5×70 cm、Φ5×60 cm)；大孔吸附树脂(HPD-100，河北宝恩化工有限公司)；超声波清洗器(jcx一250W，山东济宁超声电子仪器厂)；真空抽滤装置；甲醇(分析纯)；水为二次蒸馏水；乙腈(色谱纯)；甲酸(分析纯)；HC1(分析纯)；NaCI(分析纯)；紫锥菊提取物(含菊苣酸4％)；菊苣酸对照品。
2.2 实验部分
2.2.1. 菊苣酸的检测方法(HPLC)：
C18分析色谱柱(5微米，250 mm×4.6 mm，中国大连江申)，流动相:0.1％甲酸水溶液(A)和乙腈(B)，0～13 min，B从10％线性变化到22％ ；13～14 min，B从22％线性变化到40％;14～14.5 min，B维持在40％;14.5～15 min，B从40％线性变化到10％；15～20 min，B维持在10％。流速：1.500 mL／min，UV检测波长：330 nm，运行时间：20 min，进样量：10微米，柱温：30℃ 。
2.2.2． 吸附树脂的预处理及再生：
新购大孔吸附树脂，用甲醇充分浸泡溶胀，然后用蒸馏水洗涤至流出液清亮，备用。树脂再生采用以下方法：100％甲醇洗脱其吸附的残留杂质，浸泡树脂12小时，使其充分活化，最后以蒸馏水冲洗树脂至无甲醇味。
2.2.3． 上样溶液的制备：
本实验选择极性较强的水作提取溶剂。取40 g紫锥菊提取物，加200 mL水，超声提取40 min，真空抽滤，再次向滤渣中加200 mL水，超声提取30 min，真空抽滤，弃去滤渣，两次提取液合并混匀即可。
2.2.4． 吸附实验：
在 5×70 cm玻璃层析柱中，湿法装柱；大孔吸附树脂柱床静置约60 min后，柱床高度60 cm。以10 mL／min的流速上样，上样完成后，让树脂柱静置吸附平衡7 h以上。
2.2.5. 洗脱实验：
用800 mL水冲洗柱子中未被树脂吸附的成份，用4000 mL7％(v／v)甲醇一水溶液以30mL／min的流速进行等度洗脱。洗脱液分三次接取，第一次600 mL，第二次2100 mL，最后1300mL。洗脱液在100℃ 的恒温水浴上蒸干得产品。采用外标法对三份产品中菊苣酸含量进行定量分析。甲醇一水溶液。
2.2.6. 水洗脱对菊苣酸纯度的影响：
在7％甲醇一水溶液洗脱前，我们考察了不同体积的水洗脱未被树脂吸附的成份时对菊苣酸纯度影响。结果表明，800mL的水洗，能够有效地把水溶性的杂质除去，从而提高菊苣酸的含量。
3 结果与讨论
洗脱液的选择：实验考察了5％、7％、10％(v／v)甲醇一水三种洗脱液对菊苣酸等度洗脱的情况，对洗脱液与产品进行HPLC分析。层析柱条件放大：以 2．5 cm(树脂柱长44cm)柱子进行条件摸索后，按柱子尺寸放大。图1为两种不同尺寸柱子中菊苣酸的流出曲线，从结果看，实验放大后，不影响菊苣酸的分离效果。
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二、主要的制剂工艺
目前紫锥菊的制剂类型：剂型有煎剂、酊剂、丸剂等。一般可连续服用6个月。大剂量服用产生急腹痛、恶心、头痛、眩晕等症。哺乳期和妊娠期忌用。西方国家用于防治上呼吸道疾病如感冒、流感等，皮肤病如粉刺、疖和创伤，过敏性疾病如气喘，以及喉部疼痛等症。本品含酰胺类(主要为导丁酰胺)、咖啡酸酯(主要为紫锥菊甙和洋蓟素)、多糖、挥发油(律草烯)及蓝刺头酮(echinolone)等成分。有些成分刺激免疫系统，提高淋巴细胞和吞噬细胞的活力，增强抗菌和抗感染作用；多糖有抗透明质酸酶作用和抑制病毒作用：酰胺类成分有抗菌和抗真菌作用。剂型有胶囊剂、酊剂、煎剂、片剂、含漱剂等，也有复合制剂。    紫锥菊润喉爽由紫锥菊根提取物、维生素C和锌组成，能有效地增强人们对感冒和流感的免疫能力，缩短感冒和流感的病程，并且减少感冒和流感的症状。该产品已进入上海“可的”，“好德”、“罗森”和“良友” 连锁便利店销售。早在十七世纪，美国土著人就已经使用紫锥菊。他们用这种植物去治疗蛇咬伤、牙龈和口腔的病、感冒、咳嗽、败血症、喉咙痛、胃肠痛。在历史上它也用于治疗猩红热、梅毒、疟疾、败血症和白喉。在整个19世纪，它是美国使用最广泛的植物，分发到传统的医生和自然疗法师。直到20世纪40年代，它仍在美国官方使用植物单上，但之后被取消，因为它被抗生素所代替。    在19世纪80年代，关于紫锥菊的实验证明它仍然可能有治疗作用。今天，一些人特别提到紫锥菊减少感冒或流感的治愈时间。它也用于治疗鼻窦炎和支气管炎，而且紫锥菊药膏加快难愈合的伤口痊愈。可以从提炼物、酊剂、片剂、胶囊、药膏，而且稳定新鲜的提取物中得到。对付一般的免疫系统刺激，如果患有感冒、上呼吸道感染或膀胱炎，选择下面的服用形式。一天三次：· 1-2克干的根，做成茶 · 2-3 毫升22%酒精浓缩物稀释为含2.4%β-1，2-呋喃果糖苷 · 200毫克精华粉含有6.5:1，或
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