2005-3-21 安捷伦HPLC 1100 高级操作培训教材仅供Agilent 公司用户培训使用HPLC 1100 ChemStation 高级操作培训授课教师纪学海第一章化学工作站各个工作界面介绍在线信号显示查看Logbook 第二章方法编辑、保存编辑一个完整的方法选择所要编辑的内容方法信息( Method Information) 泵的操作参数标准自动进样器参数标准自动进样器的程序进样Wellplate 自动进样器参数柱温箱参数设置DAD 检测器参数设置运行时间表( Run Time Checklist) 存储方法运行方法用户图形友好界面——各个模块的控制Instrument 菜单简介泵的辅助功能自动进样器的扩展功能色谱柱信息的输入VWD 停泵扫描采集光谱可变波长检测器VWD 的停泵扫描功能可变波长检测器VWD 的停泵扫描功能可变波长检测器VWD 的停泵扫描功能可变波长检测器VWD 的停泵扫描功能可变波长检测器VWD 的停泵扫描功能第三章谱图优化调用数据文件Signal Details 谱图优化谱图优化工具在色谱图上加标注谱图处理工具第四章积分优化增强积分方式如何执行积分自动积分积分事件高级基线积分事件表积分工具栏作为方法的一部分存贮积分参数手动积分工具手动积分本章内容：如何建立校正表如何选择校正表的设置如何进行再校正如何使用峰识别工具建立校准表的过程校正参数的建立Calibration Settings 校正参数的设置调用标样进行积分参数优化建立一级校正表校正表的建立校正表的选择Compound Details Peak Details Identification Details 调用信号——加入二级校正加入更多的级别输入对应标样含量把校正表存入方法第六章设定报告格式定义报告定义报告: 报告输出目的地使用网络浏览器IE 查看报告报告类型选择仪器参数曲线编辑报告格式存贮到方法中打印报告报告工具显示紫外谱图光谱选项- 紫外谱图光谱选项紫外谱图显示谱图处理工具紫外谱库: 原理紫外谱库: 当前的局限性影响谱图匹配的因素创建谱库输入谱库名称及描述提取化合物光谱图把谱图加入谱库波长表谱图管理存贮谱库文件开始谱图检索- 打开谱库检索模板检索谱图检索结果检索工具峰纯度检测峰纯度分析窗口峰纯度信息- 纯峰峰纯度信息- 不纯峰附加信息- 差谱峰纯度性能选择最大吸收波长等吸收图（Isoabsorbance Plot ）3D Plot 编辑Sequence Parameters 序列数据文件格式序列表中再校正循环再校正Bracketed 序列使用Insert/FillDown Wizard 填写序列表序列输出编辑Sequence Summary 扩展统计部分序列及预览模式Partial Sequence 存贮序列文件运行序列自动进样器图标显示第九章个性化报告的设定第十章故障诊断与系统维护诊断界面（Diagnosis ）维护光盘OQ/PV 认证过程故障分析分析问题诊断早期维护反馈（EMF ）仪器详细信息进入Logbooks Error Logbook Runs Logbook 维护Logbook 诊断测试测试选择从Calibration 菜单选择Signal Details…，进入Signal Details: Instrument 1 对话框。从Signal Details: Instrument 1 对话框中定义哪些信号将在运行方法时被处理。Signal Details 对话框中未被定义的信号将不被积分和计算。如果被定义的信号未被识别，系统将调用所有的信号。注意：调用信号时，选择Load using Signal Details 。这样Signals Details 所设置的参数才有效。Calibration Table Option 菜单中包括四种不同的校正表的显示方式：Overview, Compound Details, Peak Details 和Identification Details 。Compound Details 表列出了所有的峰，并且允许用户在Low limit 和High limit 栏定义浓度的上、下限，如果计算结果超出上限或下限，报告结果中会给出一个警告：Amount limit exceeded 。而且会在超限浓度处标出＋或－。＋号表示浓度超出上限，－号表示浓度超出下限。上下限不考虑乘数因子。超限的物质不能用作再校正。要使用峰加和功能，必须保证先对色谱图进行了必要的、适当的积分处理，获得所有峰(包括需要进行定量的杂质峰)的准确峰面积。加和表中各参数设置：Segment Name: 加和化合物的名称。Start Time: 加和的起始时间。End time: 加和的终止时间。Use Reference: 选择有校正因子的化合物作为加和峰的校正因子，如果选择None, 则Response Factor 栏中的响应因子有效。小窍门：如果您需要对几个已知化合物峰的含量进行加和计算，那么您可以将这几个化合物命名成同一名称。例如：aaa 、bbb 、aaa 、aaa ，则第一、三、四个化合物的含量将自动加和打印在峰加和报告中。从Report 菜单下选择Specify Report 即可进入设定报告界面。本界面重点选择合适的定量方式（Quantitative Results ）、报告的输出目的地（Destination ）及报告类型（Style ）。工作站提供13 中默认报告格式。Short 为常用报告格式；Detail 报告可以给出工作曲线；Performance 报告中可以看到柱效高低和分离度等数据；Performance+Noise 报告可以给出各个色谱峰的信噪比，如果要得到S/N 结果，还要注意预先选择Report>> System Suitability>>Edit Noise Range…，规定噪音的范围。从Report 菜单下Edit Instrument Curves 界面中可以选择需要在报告中显示的仪器曲线。（也可以在File 菜单下Load Signal 界面中找到Instrument Curves 选项。）报告也是方法的一部分内容，需要保存到方法中去。可以从Report 菜单中找到Print Report 命令，也可以使用打印机图标打印报告。注意：使用Print Report 菜单时，将执行Specify Report 菜单中的规定，将报告输出至打印机、屏幕或生成报告文件。而使用打印机图标打印报告时，将在打印机上直接打印输出报告，而不遵从Specify Report 的规定。如果方法还不成熟，建议先使用打印预览图标，预览所得报告效果。使用图标可以快速地进行参数设置。Add License ：添加或查看工作站软件的License 号码；Agilent 1100 Series CDROM ：查看随机的维护光盘；Configuration Editor ：配置仪器；Installation Qualification ：进行软件的安装认证；Instrument 1 Online ：进入在线工作站，可以控制仪器；Instrument 1 Offline ：进入离线工作站，不可控制仪器；Readme.txt ：提供关于化学工作站的参考信息；Scheduler ：化学工作站的任务、日程安排表。本章内容都是在工作站的Data Analysis 界面下实现的。通过查看Review GLP Save Register 功能，可以证明色谱数据是否为原始数据。从仪器性能操作参数可以证明分析数据的可靠性。在View 菜单中选择GLP Register ，从文件清单中选择所要查看的数据，进入Review Option 对话框，在此对话框内，可以查看如下信息：调用原始信号；调用仪器性能数据；打印原始方法；打印原始积分结果；打印原始定量结果；通过原始方法产生原始报告。利用Left Window[%] 和Right Window[%] 可以定义检索区间。例如：一个5分钟的数据，Left Window[%] 为5，Right Window[%] 为10 ，则检索区间为5-5×5% ~ 5+5×10% 。如果在此之前选择Time Range 可以进行预筛选，加快检索速度。3D 图可以显示所采集数据的三维信息——时间、波长、吸收强度。3D 图可以旋转放大，以便观察。单击OQ/PV 键，在故障选择框中选择在OQ/PV 认证过程中出现的问题，则在右侧可能原因框中可以查到可能引发该故障的原因。可以分别选择泵、自动进样器、柱温箱或检测器进行测试。具有自动进样器的用户可以编辑序列进行自动分析。（手动进样器的用户可以使用序列的统计功能进行数据的统计）。需要注意的是：序列仅仅能够使用成熟方法，按照要求依次对标准品或未知样品进行数据采集和分析。与方法相比，序列并没有任何额外的附加功能，所以说，编辑序列的前提一定是已经具有一个成熟的方法！本页给出的是编辑序列、进行自动分析的主要步骤。在Sequence Parameters 中要规定所得数据文件命名方式。如果选用Auto 方式，一定要注意更改数据存放的子目录，否则很可能发生数据文件的覆盖、丢失。虽然一个序列中可以使用多个方法，但我们推荐的是在一个序列中仅使用一个方法，以防系统的平衡被破坏。如果使用多个方法，一般都需要设置Wait Time ，以便使系统达到平衡后才开始进样分析。注意选择适当的Shutdown 方式，可以规定序列运行结束后使系统切换到Standby 状态、关灯、关泵或整个系统关闭。在序列表中如果规定样品类型为Calibration ，意味着该样品为标样，执行的是再校正功能（而不是用以建立校正表）。通常需要在序列表中的前几行对现有的方法进行再校正，以尽量保证方法的精确、有效性，然后进行控制样品分析，以衡量该方法的定量是否准确。如果方法定量准确，会继续进行未知样品的分析，否则，序列将自动停止运行。进样达到一定次数后，需要进行循环再校正，以保证继续使用该方法定量的准确性。可以使用Interval 来规定进样几次后，自动执行再校正。此处规定的是进针次数，而不是分析的样品瓶数！！！使用Bracketed 方式Update RF ，可以在分析未知样品前、后，均进行再校正，然后使用这两次再校正的结果，对未知样品进行更准确的定量。序列既可以按照方法规定输出每次分析的结果报告，也可以同时或仅仅给出序列的统计、总结报告。Sequence Output 允许用户打印此序列的总结报告。可以通过Setup…选择总结报告中所包含的内容。报告结果可以通过打印机打印，也可以存贮到文件中，文件保存在数据的子目录下，扩展名为.txt ，用户可以打开此文件浏览。如果选择Print individual report for each run as well ，每分析一个样品后，会根据方法中的设置分别打印报告。如果选择了序列总结、统计报告，那么就需要对Sequence Summary Parameters 进行设置，选择需要报告的项目。在扩展统计中可以规定要进行数学统计的项目，还可以规定允许的偏差范围。可以通过Option 选择限度的方式：Standard Deviation, Relative Standard Deviation, 95%CI 。Standard Deviation: 样本标准偏差S。Relative Standard Deviation: 相对标记偏差RSD%(USP) 95%CI: 置信区间。具体计算方法见《了解您的化学工作站》第260 页。利用Partial Sequence 功能，可以先预览序列运行结果，还可以从中选择某行或某些行进行实际运行，只要选择后点击Run Sequence 按钮即可。各个模块都具有诊断测试，直接按照标准测试过程一步步执行即可。从随机光盘上可以查到仪器维护方法、步骤以及备件号、部件结构示意图等信息。要实现DAD 检测器高级功能的前提条件是已经安装了G218