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 （编辑：黄　杰）
 人参养荣汤对血管性痴呆大鼠的神经保护作用
 １ １ ２ １
 刘　冰，赵桂芝，王永明，应栩华
 ［摘要］　目的　初步探讨人参养荣汤对血管性痴呆的神经保护作用。方法　采用永久性结扎双侧颈总动脉血管性痴呆大鼠
 模型，从学习记忆、脑梗死面积、海马齿状回新生神经细胞和自由基损伤等方面初步考察人参养荣汤的神经保护作用。结果
 　与模型组比较，人参养荣汤组认知障碍明显改善，脑梗死面积明显降低，齿状回新生神经细胞明显增加，自由基损伤明显减轻。结论　人参养荣汤对血管性痴呆具有一定的神经保护作用，其内在机制值得深入探讨。
 ［关键词］　血管性痴呆；人参养荣汤；神经保护；神经发生；认知障碍
 ［中图分类号］　Ｒ２８５．５　　　　［文献标识码］　Ａ　　　　［文章编号］　１６８１唱２４７６（２０１０）０２唱００７３唱０３
 　　人参养荣汤首载于枟太平惠民和剂局方枠，有益
 气补血、养心安神等功效。本文观察人参养荣汤对血管性痴呆大鼠认知障碍、神经发生和自由基损伤等方面的影响，现报道如下。
1 　材料与方法
1 ．1 　实验动物　Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠，体重２２０～２６０ｇ，北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证编号ＳＣＸＫ（京）２００２－２００３。
1 ．2 　模型复制、分组与给药　取大鼠３０只，１０％水合氯醛麻醉，分离双侧颈总动脉，双重丝线结扎后随即剪断。随机分为模型组和人参养荣汤组，２组动物数基本相当。另取大鼠１５只，除不结扎动脉外操作如前，设为假手术组。术后次日，各组动物处置如下：假手术组及模型组给予自来水１ｍｌ，人参养荣
 作者单位：１３１０００７　浙江杭州，浙江省中医药研究院中医临床研究所）
 ２３０００７０　天津，天津医科大学公共卫生学院
 汤组给予人参养荣汤５ｇ／ｋｇ（相当于生药含量，本研
 究所自煎），连续４周。
1 ．3 　Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫　测试前先采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫
 （中国医学科学院药物研究所）训练６天，以潜伏期
 （从入水到找到平台所用时间）和游泳距离（从入水到找到平台的总行程）为测试成绩的指标，每天每只大鼠在４个象限共训练４次，每次游泳时间为
 ６０ｓ，第７天成绩记做测试成绩。测试于实验结束前
 １周进行。
1 ．4 　自由基损伤　末次给药后６ｈ，每组取６只大鼠，断头，冰上分离海马，称重，以冷生理盐水制成匀浆液（质量体积比１：９），低温分离取上清，考马斯亮兰法测定蛋白含量。按说明书测定ＭＤＡ、ＧＳＨ含量和ＳＯＤ活性。
1 ．5 　神经发生　末次给药前２天，每组取３只大鼠，以５０ｍｇ／ｋｇＢｒｄＵ腹腔注射２次，每次间隔８ｈ。水合氯醛麻醉，４％多聚甲醛灌注，取脑，置于多聚甲醛后固定过夜，２０％蔗糖沉底，选择齿状回部位冠状
 位冰冻切片，脑片厚３０μｍ，置于磷酸盐缓冲液。常
 规免疫荧光染色（ａｎｔｉ－ＢｒｄＵ稀释比１：４００，ａｎｔｉ－ＮｅｕＮ稀释比１：５００）。摄片并计算ＢｒｄＵ／ＮｅｕＮ阳性细胞数。
1 ．6 　脑梗死范围　末次给药后６ｈ，每组取５～６只大鼠，断头取脑，剔除嗅球、小脑和低位脑干。将大脑连续冠状切成５片。用１％ＴＴＣ（氯化三苯基四氮唑）染色，３７℃避光温孵１５ｍｉｎ。按切片顺序排列并拍照，计算脑梗死面积。
1 ．7 　统计学处理　所有描述性参数以均数±标准差表示，组间比较采用单因素方差分析。用
2 ．3 　人参养荣汤对神经发生的影响　造模后，大鼠
 ＢｒｄＵ／ＮｅｕＮ阳性细胞数明显增加；在此基础上，给药组大鼠阳性细胞数进一步显著增加（见图１～３，表３）。
 表3 　人参养荣汤对神经发生的影响　（x 珋± s ）
 组别 阳性细胞数假手术组 ５３．０６±５．７８
 模型组 １３１．２５±７．９２△△
 人参养荣汤组 ２１６．４８±１４．５１倡倡
 ＳＰＳＳ１３．０软件包进行分析，P ＜０．０５为差异有显著性。
2 　结果
 　　注：与假手术组比较，△△
 ＜０．０１
P ＜０．０１；与模型组比较，倡倡P