实验室常用技术参数资料
一、核酸及蛋白质常用数据
化合物 
分子量 
λmax(pH7.0) 
1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值 
OD280/OD260 
ATP 
507 
259 
15400 
0.15 
CTP 
483 
271 
9000 
0.97 
GTP 
523 
253 
13700 
0.66 
UTP 
484 
262 
10000 
0.38 
dATP 
494 
259 
15200 
0.15 
dCTP 
467 
271 
9300 
0.98 
dGTP 
507 
253 
13700 
0.66 
dTTP 
482 
267 
9600 
0.71 
2．常用核酸的长度与分子量
核酸	核苷酸数	分子量		λDNA	48502（双链环状）	3.0×107		pBR322	4363（双链）	2.8×106		28SrRNA	4800	1.6×106		23SrRNA	3700	1.2×106		18SrRNA	1900	6.1×105		19SrRNA	1700	5.5×105		5SrRNA	120	3.6×104		tRNA（大肠杆菌）	75	2.5×104		3．常用核酸蛋白换算数据
（1）重量换算
1μg=10-6g　　　　　 1pg=10-12g
1ng=10-9g 　　　　　1fg=10-15g
（2）分光光度换算：
1A260双链DNA=50μg/ml
1A260单链DNA=30μg/ml
1A260单链RNA=40μg/ml
（3）DNA摩尔换算：
1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端
1μg pBR322 DNA=0.36pmol
1pmol 1000bp DNA=0.66μg
1pmol pBR322=2.8μg
1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿
1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿
1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿
（4）蛋白摩尔换算：
100pmol分子量100，000蛋白质=10μg
100pmol分子量50，000蛋白质=5μg
100pmol分子量10，000蛋白质=1μg
氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿
（5）蛋白质/DNA换算：
1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质
10，000MW蛋白质=270bp DNA
30，000MW蛋白质=810bp DNA
50，000MW蛋白质=1.35kb
100，000MW蛋白质=2.7kb DNA
4．常用蛋白质分子量标准参照物
（1）高分子量标准参照	（2）中分子量标准参照	（3）低分子量标准参照		肌球蛋白	分子量	磷酸化酶B	97，400	碳酸酐酶	31，00		肌球蛋白	212，000	牛血清白蛋白	66，200	大豆脻蛋白酶	21，500		β-半乳糖甘酶B	116，000	谷氨酶脱氢酶	55，000	抑制剂	　		磷酸化酶B	97，400	卵白蛋白	42，700	马心肌球蛋白	16，900		牛血清白蛋白	66，200	醛缩酶	40，000	溶菌酶	14，400		过氧化氢酶`	57，000	碳酸酐酶	31，000	肌球蛋白（F1）	8，100		醛缩酶	40，000	大豆脻蛋白酶	21，500	肌球蛋白（F2）	6，200		　	　	抑制剂	　	肌球蛋白（F3）	2，500		　	　	溶菌酶	14，400	　	　		5．常用DNA分子量标准参照物
λDNA/HindⅢ	λDNA/EcoRⅠ	λ/HindⅢ+EcoRⅠ	pBR322/HaeⅢ		23130	21226	21227	587	123		9416	7421	5148	405	104		6557	5804	4973	504	89		4361	5643	4268	458	80		2322	4843	3530	434	64		2027	3530	2027	267	57		564	　	1904	234	51		125	　	1584	213	21		　	　	1375	192	18		　	　	974	184	11		　	　	831	124	7		　	　	564	　	　		　	　	125	　	　		续上表
pBR322/HinfⅠ	φχ174/HinfⅠ	φχ174/Hae Ⅲ	φχ174/TapⅠ		1631	726	140	1353	2914		517	713	118	1078	1175		506	553	100	872	404		396	500	82	603	327		344	417	66	310	231		298	413	48	281	141		221	311	42	271	87		220	249	40	234	54		154	200	24	194	33		75	151	　	118	20		　	　	　	72	　		二、常用缓冲液
1．分子克隆常用缓冲液
2．磷酸缓冲液
（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※
pH	1mol/L K2HPO4(ml)	1mol/L KH2PO4(ml)		5.8	8.5	91.5		6.0	13.2	86.8		6.2	19.2	80.8		6.4	27.8	72.2		6.6	38.1	61.9		6.8	49.7	50.3		7.0	61.5	38.5		7.2	71.7	28.3		7.4	80.2	19.8		7.6	86.6	13.4		7.8	90.8	9.2		8.0	94.0	6.2		（2）25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※
pH	1mol/L Na2HPO4(ml)	1mol/L NaH2PO4(ml)		5.8	7.9	92.1		6.0	12.0	88.0		6.2	17.8	82.2		6.4	25.5	74.5		6.6	35.2	64.8		6.8	46.3	53.7		7.0	57.7	42.3		7.2	68.4	31.6		7.4	77.4	22.6		7.6	84.5	15.5		7.8	89.6	10.4		8.0	93.2	6.8		※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值：
pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])
在此，pK’=6.86(25℃)。
3．电泳缓冲液
测序凝胶加样缓冲液
98%去离子甲酰胺
10mol/L EDTA(pH8.0)
0.025%二甲苯青FF
0.025%溴酚蓝
甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。
常用的电泳缓冲液
缓冲液	使用液	浓贮存液（每升）		Tris-乙酸（TAE）	1×：0.04mol/L Tris-乙酸	50×：242g Tris碱		　	0.001mol/L EDTA	57.1ml冰乙酸		　	　
实验室常用技术参数资料.doc