第二章 氨基酸与蛋白质的一级结构 第一节.蛋白质概述 1.1 蛋白质的功能与分布 单细胞生物 胞外酶 鞭毛-蛋白质(运动器官) 细胞壁-糖、脂、肽 细胞膜-载运蛋白、酶蛋白 细胞核-酶蛋白(催化遗传) 细胞质-酶蛋白(催化物质代谢) 多细胞动物个体层次 毛发、皮肤:角蛋白 毛发、皮肤:角蛋白 蛋白质分布广泛、功能多样 1. 催化功能-酶 2. 结构功能-皮、毛、骨、牙、细胞骨架 3. 载运功能-膜蛋白 4. 调控功能-激素 如胰岛素 组蛋白 5. 运动功能-鞭毛、肌肉蛋白 6. 防御功能-免疫球蛋白 7. 接受和传递信息 视色素 味觉蛋白 1.2 蛋白质的组成与结构 max.book118.com 蛋白质的元素组成 主要由C、H、O、N四种元素组成。 大多数蛋白质还含有S, 有些结合蛋白质含有Fe、Cu、Mg、Zn等 氮的含量接近16%。 样品中蛋白质含量/含氮量称作蛋白质系数。 动物蛋白质系数为6.25,植物在5.7左右 max.book118.com 蛋白质的分类 一、依据蛋白质的外形分类 球状蛋白质、纤维状蛋白质。 球状蛋白质:globular protein外形接近球形或椭圆形,溶解性较好,能形成结晶,大多数蛋白质属于这一类。 纤维状蛋白质:fibrous protein分子类似纤维或细棒。又可分为可溶性纤维状蛋白质和不溶性纤维状蛋白质。 二、依据蛋白质的组成分类 按照蛋白质的组成,可以分为 简单蛋白(simple protein) 和结合蛋白(conjugated protein) 。 简单蛋白 又称为单纯蛋白质;这类蛋白质只含由-(氨基酸组成的肽链,不含其它成分。 1,清蛋白和球蛋白:albumin and globulin广泛存在于动物组织中。清蛋白易溶于水,球蛋白微溶于水,易溶于稀酸中。 2,谷蛋白(glutelin)和醇溶谷蛋白(prolamin):植物蛋白,不溶于水,易溶于稀酸、稀碱中,后者可溶于70-80%乙醇中。 3,精蛋白和组蛋白:碱性蛋白质,存在与细胞核中。 4,硬蛋白:存在于各种软骨、腱、毛、发、丝等组织中,分为角蛋白、胶原蛋白、弹性蛋白和丝蛋白。 结合蛋白 由简单蛋白与其它非蛋白成分结合而成, 色蛋白:由简单蛋白与色素物质结合而成。如血红蛋白、叶绿蛋白和细胞色素等。 糖蛋白:由简单蛋白与糖类物质组成。如细胞膜中的糖蛋白等。 脂蛋白:由简单蛋白与脂类结合而成。 如血清脂蛋白等。 核蛋白:由简单蛋白与核酸结合而成。如细胞核中的核糖核蛋白等。 三、按功能分类 1. 酶类 2. 运输蛋白 3. 运动蛋白 4. 激素蛋白 5. 细胞激动素 6. 防御蛋白 7.结构蛋白 第二节.氨基酸 2.1 氨基酸的种类与结构 含有氨基的羧酸 (一)、 化学结构 R-CH(NH2)-COOH R 代 表 氨 基 酸 之 间 相 异 的 部 分 , 叫 R 基 (R group), 又 称 为 侧 链 (sidechain) 。 无色晶体、溶于水 max.book118.com. 氨基酸的旋光性与构型 旋光性:可使偏振光平面发生旋转 不对称碳原子:碳原子所连的4个碳原子不相同 构型 :不对称碳原子周围的取代基在空间上的排列 20种氨基酸除甘氨酸外都具有旋光性 除甘氨酸(Gly)外, (-C都是不对称碳原子,且都为L-构型 构型的改变需要共价键的的破坏与重新形成,与氢键无关,氨基酸的L- 、D-型都是以甘油醛为标准确定的。 max.book118.com. 常见的蛋白质氨基酸 20种都是(-氨基酸 除甘氨酸(Gly)外, (-C都是不对称碳原子,且都为L-构型 脯氨酸(Pro)不含游离的氨基,为亚氨基酸 半胱氨酸(Cys)和蛋氨酸(Met)含有S元素 max.book118.com. 非蛋白质氨基酸 各种生物分离到的氨基酸已达250种以上 激素、代谢中间产物、毒素、抗菌素等 max.book118.com、蛋白质氨基酸的分类 按侧链(-R)的性质,常见的蛋白质氨基酸被分为四类: 1. 非极性R基氨基酸(共9种): 甘氨酸(Gly) 丙氨酸(Ala) 缬氨酸(Val) 亮氨酸(Leu) 异亮氨酸(Ile) 脯氨酸(Pro) 色氨酸(Trp) 甲硫氨酸(Met) 苯丙氨酸(Phe) 2.无电荷的极性R基氨基酸(共6种): 丝氨酸(Ser), 苏氨酸(Thr), 酪氨酸(Tyr), 半胱氨酸(Cys), 天冬酰胺(Asn), 谷氨酰胺(Gln)? 3.带正电荷的极性R基氨基酸(共3种): 赖氨酸(Lys), 精氨酸(Arg), 组氨酸(His) 4.带负电荷的极性R基氨基酸(共2种): 天冬氨酸(Asp) 谷氨酸(Glu) max.book118.com. 必需氨基酸 人和动物维持正常生理功能所必需,而又不能自身合成的氨基酸称为必需氨基酸(essential amino acids)。 必需氨基酸包括赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸和精氨酸,其中组氨酸和精氨酸,人虽然能合成,但效率低,尤其在婴幼儿时期,需要由外界供给。 2.2 氨基酸的性质 max.book118.com. 氨基酸的两性解离 氨基酸分子中既含有酸性的-COOH,又含有碱性的-NH2。属两性离子(带相反电荷的极性分子叫做两性离子或偶极离子) (-COOH的 pK = 2左右;(-NH2的pKa = 9左右( pK 解离常数的负对数) 当氨基酸所带正电荷与所带负电荷相等时,溶液的PH值为这一种氨基酸的等电点(PI) max.book118.com. 氨基酸的化学反应 1)氨基参加的反应 与HNO2的反应 与甲醛的反应 酰基化和烃基化反应 2)羧基参加的反应 成酯与成盐反应 酰氯化与酰胺化反应 3)氨基和羧基共同参加的反应 与茚三酮的反应 形成肽键 4)侧链具有的反应 形成二硫键 成酯反应 1)氨基参加的反应 与HNO2的反应 放出氮气,可用于计算氨基酸的量。 酰基化 烃基化反应 酰基化反应 丹磺酰氯(DNS-CL)与氨基酸反应生成荧光性质强和稳定的磺胺衍生物 用于多肽链NH3末端氨基酸的标记 烃基化反应 2,4-二硝基氟苯(DNFB ,Sanger试剂)在弱碱性溶液中与氨基酸发生取代反应,生成黄色化合物二硝基苯基氨基酸。 苯异硫氰酸酯( PITC)在弱碱性条件下,与氨基酸反应生成苯乙内酰硫脲衍生物,此反应又称之Edman反应,氨基酸序列测定常用的反应 2)羧基参加的反应 成酯与成盐反应 酰氯化与酰胺化反应 3)氨基和羧基共同参加的反应 与茚三酮的反应 茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热,具有游离氨基的氨基酸都生成紫色化合物。脯氨酸是一个亚氨基酸,生成黄色化合物。 4)侧链具有的反应 形成二硫键 -成酯反应 第三节.氨基酸的分离与分析
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