室内检验员专业技术知识之重量、活力等测定 第十二章 重量测定 第一节 概述 一、种子千粒重的含义 种子重量测定是指测定一定数量种子的重量,通常是指测定1000粒种子的重量,即千粒重。 种子千粒重是指种子质量标准规定水分的1000粒种子的重量,以克为单位。 千粒重测定原则是从充分混合的净种子中随机数取一定数量的种子,称其重量。 第一节 概述 二、千粒重测定目的和意义 1.种子千粒重反映种子的饱满程度,是种子质量的指标之一。 2.根据千粒重,可以做到精量播种,节约用种。 3.千粒重是作物产量构成的要素之一。 第二节 测定程序 一、测定方法 分为百粒法、千粒法和全量法三种。 二、百粒法测定程序 1.数取试样:从净度分析后充分混合的净种子中,随机数取试验样品8个重复,每个重复100粒。 2.试样称重:8个重复分别称重,小数位点保留位数与净度分析中的规定相同。 3.检查重复间的容许变异系数,计算实测千粒重。 4.换算成规定水分下的千粒重。 5.结果报告。 第二节 测定程序 三、千粒法测定程序 1.数取试样:从净度分析后充分混合的净种子中,随机数取试验样品2个重复,大粒种子每个重复500粒,中小粒种子每个重复1000粒。 2.试样称重:2个重复分别称重,小数位点保留位数与净度分析中的规定相同。 3.检查重复间的容许变异系数,计算实测千粒重. 两份重量的差数与平均数之比不能超过去5%,否则再做一份重复,直至达到要求.取差数最小的两份重复平均数来计算千粒重。 4.换算成规定水分下的千粒重。p152 5.结果报告。 第二节 测定程序 四、全量变法测定程序 1.数取试样:数取净度分析后的全部净种子的种子总粒数。 2.试样称重:小数位点保留位数与净度分析中的规定相同。 3.换算成规定水分下的千粒重。 4.结果报告。 第十四章 生活力的四唑测定 实际工作中如种子贸易时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态则难以通过发芽测定得到结果。 种子生活力测定可以满足这一需要，四唑测定可以测定出休眠种子样品的生活力百分率。 四唑测定方法于1942年由德国的G. Lakon教授发明，第2次世界大战期间传入美国。随着四唑测定技术的发展，ISTA(国际种子检验协会)于1950年成立四唑测定技术委员会，致力于种子四唑测定技术的发展。 2003年出版《ISTA四唑测定工作手册》，列有120种农业和122种林业种、属的四唑测定方法。 第一节 概述 一、生活力概念 种子生活力（seed viability）是种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 第一节 概述 二、种子生活力测定的意义 1. 可以测定休眠种子的生活力 2.快速预测种子发芽能力 种子贸易中，常因时间紧迫，不可能采用正规的发芽试验来测定发芽力，这是因为发芽试验所需的时间更长。 林木种子可用生活力代替发芽力。 第一节 概述 三、四唑染色测定的原理 在种子组织活细胞内脱氢酶的作用下，无色的氯化三苯基四氮唑，接收活种子代谢过程中呼吸链上的氢，在活细胞里变成还原态的红色、稳定、不扩散的三苯基甲 月替(Triphenyl Formazam)。可根据四唑染成的颜色和部位，区分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。 2，3，5-氯化三苯基四氮唑 三苯基甲月替 (无色) (红色) 第一节 概述 种子有无生活力主要取决于胚和(或)胚乳(或配子体)坏死组织的部位和面积的大小，而不一定在于颜色的深浅。颜色的差异主要是将健全的、衰弱的和死亡的组织判别出来。根据以上理由和所用指示剂，把这种测定称为“局部解剖图形的四唑测定”(topographical tetrazolium test)。 这就是说，是根据种子胚和活营养组织局部解剖染色部位及颜色状况，鉴定种子胚的死亡部分，查明种子死亡的原因。 第一节 概述 四、四唑测定适用的范围 收获后需马上播种的种子； 具有深休眠的种子； 发芽缓慢的种子； 要求估测发芽潜力的种子。 另外，也适用于测定发芽末期个别种子的生活力，特别是怀疑有休眠时；测定已萌发种子，或收获期间存在的不同类型和/或加工的损伤（热害、机械损伤或虫蛀等）种子；解决发芽试验中存在的问题，如不清楚不正常幼苗产生的原因或怀疑杀菌剂的处理效果等。 第一节 概述 五、四唑测定方法的特点 四唑测定是一种世界公认、广泛应用、实用方便、省时快速、结果可靠的种子生活力检验方法。具体地说具有以下几个特点： 1.原理可靠，结果准确。 如能正确使用四唑测定方法，四唑测定结果与发芽率误差一般不会超过3%～5%。 2.不受休眠限制。 3.方法简便、省时快速。 4.成本低廉。 四唑测定也有其缺陷：如对种子检验员经验和技能要求较高；结果不能提供休眠的程度；处理种子不会像发芽试验能反映药害情况。 第二节 试剂的配制和仪器设备 一、试剂的配制 1．四唑溶液 2．磷酸缓冲液 3．乳酸苯酚透明液 采用乳酸苯酚透明液，是使小粒豆类和牧草种子经四唑染色后使种皮、稃壳或胚乳变为透明,以便透过这些部分清楚地观察其胚主要构造的染色情况。 第二节 试剂的配制和仪器设备 二、仪器和设备 四唑测定的主要仪器设备与发芽试验设备相同，可采用其设备：如电热恒温箱或发芽箱、冰箱。 四唑测定需配备的小器具有：种子切割工具如解剖刀或刀片、小针、切割垫板等；种子预湿需要纸、毛巾、烧杯等器具；染色时，要准备有盖的不同规格的染色盘、棕色加液器、镊子、吸管等；观察器具如体视显微镜或放大镜；以及保护器具如手套、眼睛保护镜、废液处理容器等。 第三节 四唑测定程序 一、试验样品的来源数取 试验样品来源必须是净种子。净种子可以从净度分析后的净种子中随机数取，也可以从送验样品中直接随机数取。一般随机数取100粒种子，2～4个重复或少于100粒的若干副重复。 如果是测定发芽末期休眠种子的生活力，则可单用试验末期的休眠种子。 委托检验可以直接从经充分混合的种子样品中随机数取种子。 第三节 四唑测定程序 二、种子预处理 在正式测定前，对所测种子样品需经过预处理（预措预湿），其主要目的是使种子加快和充分吸湿，软化种皮，方便样品准备和促进活组织酶系统的活化，以提高染色的均匀度、鉴定的可靠性和正确性。 第三节 四唑测定程序 预措---是指在种子预湿前除去种子的外部附属物和在种子非要害部位弄破种皮，如水稻种子需脱去内外稃壳，豆科硬实种子刺破种皮等，但须注意，预措不能损伤种子内部胚的主要构造。绝大多数种子不须进行预措处理，但有一些种子在预湿前要进行预措处理。 预湿是四唑染色测定的必要步骤。预湿方法目前常用的有以下两种方法： 第三节 四唑测定程序 1．缓慢润湿 缓慢润湿是按种子发芽试验所采用方法，将种子放在纸床上或纸巾间，让其缓慢吸湿。该法适用于那些直接浸在水中容易破裂和损伤的种子，以及已经劣变的种子或过分干燥的种子。 缓慢润湿可采用下面两种方法： ①纸卷或纸间预湿 ②纸床上预湿
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