范围本标准规定了微生物和生物医学实验室生物安全防护的基本原则、实验室的分级、各级实验室的基本要求。本标准为最低要求。本标准适用于疾病预防控制机构、医疗保健、科研机构。定义1—实验室生物安全防护biosafety protection for laboratories 实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境有受其污染。定义2—微生物危害评估hazard assessment for microbes 对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估。定义3—气溶胶aerosol 悬浮于气体介质中粒径一般为0.001 μm~1000μm 的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态分散体系。 定义4—生物安全柜biosafety cabinet 处理危险性微生物时所用的箱形空气净化安全装置。 定义5—I 级生物安全柜class Ⅰbiosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口，外部空气由操作窗口吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。 定义6—II 级生物安全柜class Ⅱbiosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部操作窗口。外部空气由操作窗口吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员不受侵害，也保证实验对象不受污染。定义7—III 级生物安全柜class III biosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气，正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完全隔绝。定义8—物理抑制设备physical containment device 用物理或机械方法防止致病微生物逸出的设备定义9—高效空气过滤器HEPA(high efficiency particulate air) filter 在额定风量下，对粒径大于等于0.3 μm 的粒子捕集效率在99.97%以上及气流阻力在245 Pa 以下的空气过滤器。 定义10—相对压强relative pressure 绝对压强减去大气压强之值。定义11—窗口期病毒感染人体后但尚未产生抗体前的一段时间，在此期间病毒在人体内大量复制，抗体检测呈阴性。实验室生物安全防护的基本原则安全设备和个体防护实验室设计与建造的特殊要求安全操作规程致病微生物及其毒素在实验室之间的传递管理制度微生物危害评估总则1. 实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施，实验室的特殊设计和建设要求，严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。2. 应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人。3. 生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。安全设备和个体防护安全设备和个体防护是确保实验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。1. 生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。安全设备和个体防护2. 必要时实验室应配备其他安全设备，如设置配有排风净化装置的排气罩等，或采用其他不使致病微生物逸出确保安全的设备。3. 实验室所配备的离心机应在生物安全柜或本标准2中所指的其他安全设备中使用，否则必须使用安全密封的专用离心杯。4. 必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品。实验室设计与建造的特殊要求包括: 实验室的选址、平面布置、围护结构、通风空调、安全装置及特殊设备等设计与建造的特殊要求。安全操作规程1. 本标准针对不同等级的生物安全防护实验室所规定的安全操作规程，包括标准的安全操作规程和特殊的安全操作规程，必须在实验室的生物安全手册中明列并加以执行。2. 针对不同的微生物及其毒素应补充规定相应的特殊安全操作规程，也应在各实验室的生物安全手册中明列并加以执行。致病微生物及其毒素在实验室之间的传递致病微生物及其毒素在实验室之间的传递必须严格按照国家现行有关管理办法执行。管理制度实验室基本管理实验室特殊管理实验室基本管理1 实验室内的布置和准入 a）在主实验室应合理设置清洁区、半污染区和污染区； b）非实验有关人员和物品不得进入实验室； c）在实验室内不得进食和饮水，或者进行其他与实验无关的活动； d）实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准。实验室基本管理2. 实验室工作人员的资格和培训 a）实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作； b）实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作； c）实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。 d）三级和四级生物安全防护实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。实验室特殊管理为避免和处理源于不安全操作引起的意外事故，必须严格执行以下原则：1. 针对可能的的危险因素，设计保证安全的工作程序。2. 事前进行有效的培训和摸拟训练。3. 对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的措施，足以应付紧急情况。实验室特殊管理4. 实验室事故处理：工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染、污染试验台面等均视为安全事故。应视事故类型等不同情况，立即进行紧急处理。具体措施必须形成书面文件并严格遵守执行。在紧急处理的同时必须向有关专家和领导汇报，并详细记录事故经过和损伤的具体部位和程度等，由专家评估是否需要进行预防性治疗。5 应填写正式的事故登记表，并按规定报告给国家相应级别的卫生主管部门。微生物危害评估当建设使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估。微生物危害评估1. 通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作。2. 根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。实验室的分类、分级分类：一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫)和实验脊椎动物生物安全防护实验室。分级：每类生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。各级实验室的生物安全防护要求依次为：一级最低，四级最高。实验室的适用范围适用范围：一般生物安全防护实验室实验脊椎动物生物安全防护实验室一般生物安全防护实验室-1、2 1.一级生物安全防护实验室：实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。2.二级生物安全防护实验室：实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。一般生物安全防护实验室-3 3. 三级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清学实验除外)应在三级生物安全防护实验室中进行。一般生物安全防护实验室-4 4. 四级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。实验脊椎动物生物安全防护实验室其适用微生物范围与同级的一般生物安全防护实验室相同。一级生物安全防护实验室的基本要求1. 安全设备和个体防护1.1 一般无须使用生物安全柜等专用安全设备。1.2 工作人员在实验时应穿工作服，戴防护眼镜。1.3 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。一级生物安全防护实验室的基本要求2 实验室设计和建造的特殊要求2.1 每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。2.2 实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯。2.3 实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。2.4 实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持生物废弃物容器的台(架)。2.5 实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。二级生物安全防护实验室的基本要求1. 安全设备和个体防护1.1 可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜( II 级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备1.2 处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜( II 级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。二级生物安全防护实验室的基本要求1.3 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。1.4 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。1.5 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。