细胞原代培养一、实验原理细胞培养原代培养传代培养悬浮培养贴壁培养二、实验内容——小鼠脾淋巴细胞悬浮培养三、实验用品昆明种小鼠、剪子、镊子、培养皿、200 目细胞筛、注射器针芯、台式离心机、PBS 、0.83%Tris-NH4Cl 、记号笔、光学显微镜等四、实验步骤1 、颈椎脱臼处死小鼠,取脾,置于细胞筛中2 、加入适量PBS ,研磨至无组织块3 、收集滤液至离心管,1500rpm 离心10min 4 、弃上清,加入5~6mlTris-NH4Cl ,摇匀,室温放置5min ,1500rpm 离心10min 5 、弃上清,加入5mlPBS ,摇匀,1500rpm 离心10min 6 、重复5 7 、弃上清,加入1mlPBS 8 、取10 μl ,计数9 、调节细胞悬液浓度至1×106 /ml 10 、接种至96 孔细胞培养板(每孔100 μl )五、实验报告1 、实验内容2 、实验步骤3 、本组的细胞计数数据及平均细胞密度4 、本组是如何稀释至接种一块96 孔细胞培养板的体积和浓度的?* * *
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