由于现代科学技术进步，特别是将波谱解析方法（NMR 、MS 、IR 、UV ）用于推导化合物的结构，甚至用X－晶体衍射来确定化合物结构的发展，以及分离手段的进步，天然药化的发展速度大为加快，发现的新化合物数目大为增加，微量成分、水溶性成分的分离、提纯；稳定性差的活性物资的分离等也不再是难题了。天然药物化学本身也已不再是原先的分离提取、结构鉴定，而是逐步发展成生测指导下的分离提取、结构鉴定，及半合成修饰和全合成紧密结合的一门学科。1) 提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2) 提取方法①粉碎成粗粉②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法3) 分离纯化法①根据物质溶解度的不同进行分离a. 温度不同,溶解度不同b. 改变溶液的极性去杂c. 酸碱法d. 沉淀法②根据物质分配比不同极性分离a. 液-液萃取法b. 反流分布法c. 液滴逆流层析法d. 高速逆流层析法e.GC 法f.LC 法:LC 分配层析载体主要有--- 硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。③根据物质吸附性不同极性分离a. ※极性吸附剂（如SiO2,Al2O3...) 极性强，吸附力大※非极性吸附剂( 如活性炭－对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。b. 化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定; 溶剂的极性大小可按其介电常数( )大小排列（极性渐大> ）: 己烷 苯 无水乙醚CHCl3	 AcOEt	 乙醇 甲醇水 1.88 2.29 4.47	 5.20 6.11 26.0 31.2 81.0	 c. 氢键力吸附 聚酰胺吸附层析-- 洗脱剂的洗脱力由小到大为: 水> 甲醇> 丙酮> NaOH 液> 甲酰胺> 尿素水液④根据物质分子的大小进行分离 如葡萄糖凝胶(Sephadex G and LH-20...) 过泸法等⑤根据物质解离程度不同的分离法 离子交换法： 强酸：-SO3H 	 强碱：-N+(CH3)3Cl- 	 弱酸：-CO2H 	 弱碱：-NH2(NH,N) 	 从天然物中分离到化合物单体后,需进行结构鉴定,方法有波谱法,化学法,文献调研等。1) 纯化和干燥化合物的样品2) 通过文献调研，理化常数和化学定性分析等初步判断结构类型3) 由波谱法等确定分子式，分子量，不饱和度；进一步推出结构官能团－－推出结构片断或骨架－推出平面结构－确定其构型，构象。第二章糖和苷类的生理活性是多种多样的，糖是植物光合作用的初生产物，通过它进而合成了植物中的绝大部分成分。所以糖类除了作为植物的贮藏养料和骨架之外，还是其它有机物质的前体。一些具有营养、强壮作用的药物，如山药、何首乌、大枣等均含有大量糖类。苷类种类繁多，结构不一，其生理活性也多种多样，在心血管系统、呼吸系统、消化系统、神经系统以及抗菌消炎，增强机体免疫功能、抗肿瘤等方面都具有不同的活性，苷类已成为当今研究天然药物中不可忽视的一类成分。许多常见的中药例如人参、甘草、柴胡、黄芪、黄芩、桔梗、芍药等都含有苷类。单糖结构的表示方法：离端基碳最远的碳原子的构型D 型／L 型(Haworth 式限于羰基碳与该原子成环的）端基碳(anomeric carbon) 的相对构型α型／β型(Haworth 式限于羰基碳与该原子成环的）是C1 相对于C5 的构型，因此β-D- 糖和α-L- 糖的端基碳原子的构型是一样的。吡喃糖(pyranose ，六员环)／呋喃糖(furanose ，五员环)，吡喃糖的优势构象－－椅式。5 、支碳链糖糖链中含有支链，如D- 芹糖(D-apiose) 和D- 金缕梅糖(D-hamamelose, 结构如下) 糖醛酸易环合成内酯，在水溶液中呈平衡状态。化学命名：把除末端糖之外的叫糖基，并标明连接位置和苷键构型。植物中的三糖大多是以蔗糖为基本结构再接上其它单糖而成的非还原性糖，四糖和五糖是三糖结构再延长，也是非还原性糖。三、多聚糖(polysaccharides, 多糖) 是由10 个以上的单糖基通过苷键连接而成。聚合度：100 以上至几千性质：与单糖和寡糖不同，无甜味，非还原性分类：1. 按功能分水不溶的，直糖链型，主要形成动植物的支持组织。ex. 纤维素，甲壳素溶于热水形成胶体溶液，多支链型，动植物的贮存养料。ex. 淀粉，肝糖元四、苷类(glycoside) ( 又称配糖体) 苷类化合物的组成：苷元(配基)：非糖的物质，常见的有黄酮，蒽醌，三萜等。苷类苷键：将二者连接起来的化学键，可通过O,N,S 等原子或直接通过N-N 键相连。糖(或其衍生物，如氨基糖，糖醛酸等) 苷类化合物的命名：以-in 或–oside 作后缀。一氧苷：苷元与糖基通过氧原子相连，根据苷元与糖缩合的基团的性质不同，分为以下几类：醇苷：是通过醇羟基与糖端基脱水而成的苷。比较常见，如本书所讲皂苷，强心苷均属此类。酚苷：苷元的酚羟基与糖端基脱水而成的苷。较常见，如黄酮苷、蒽醌苷多属此类。酯苷：苷元的羟基与糖端基脱水而成的苷。酯苷的特点：苷键既有缩醛的性质，又有酯的性质，易为稀酸和稀碱水解。例如，存在于所有百合科植物，特别是郁金香属植物如杂种郁金香(Tulipa hybrida) 中的化合物山慈菇苷A(tuliposide A) ，有抗真菌活性。但该化合物不稳定，放置日久易起酰基酰基重排反应，苷元由C1 －OH 转至C6—OH 上，同时失去抗真菌活性。山慈茹苷水解后立即环合生成山慈茹内酯A(tulipalin A) 。某些二萜和三萜醇苷常有双糖链，其中一个糖链有接在羧基上成酯苷结构，尤其在三萜皂苷中多见。如中药地榆的根和根茎能凉血止血，除了含有鞣质外，还含有乌苏酸的苷，如地榆皂苷E是一个双糖链的苷，其中一个为酯苷。二硫苷：是糖的端基OH 与苷元上巯基缩合而成的苷。如萝卜中的萝卜苷。芥子苷是存在于十字花科植物中的一类硫苷，其通式如下，几乎都是以钾盐的形式存在。经其伴存的芥子酶水解，生成的芥子油含有异硫氰酸酯类、葡萄糖和硫酸盐，具有止痛和消炎作用。三氮苷：糖的端基碳与苷元上氮原子相连的苷称氮苷，是生物化学领域中的重要物质。如核苷类化合物。四碳苷：是一类糖基和苷元直接相连的苷。组成碳苷的苷元多为酚性化合物，如黄酮、查耳酮、色酮、蒽醌和没食子酸等。尤其以黄酮碳苷最为常见。碳苷常与氧苷共存，它的形成是由苷元酚羟基所活化的邻对位的氢与糖的端基羟基脱水缩合而成。因此，在碳苷分子中，糖总是连在有间二酚或间苯三酚结构的环上。黄酮碳苷的糖基均在A环的6位或8位。碳苷类化合物具有溶解度小、难以水解的特点。一性状：形：苷类化合物多数是固体，其中糖基少的可以成结晶，糖基多的如皂苷，则多呈具有吸湿性的无定无形粉末。味：苷类一般是无味的，但也有很苦的和有甜味的，如甜菊苷(stevioside), 是从甜叶菊的叶子中提取得到的，属于贝壳杉烷型四环二萜的多糖苷，比蔗糖甜300 倍，临床上用于糖尿病患者作甜味剂用，无不良反应。色：苷类化合物的颜色是由苷元的性质决定的。糖部分没有颜色。三旋光性：多数苷类化合物呈左旋，但水解后，由于生成的糖常是右旋的，因而使混合物呈右旋。因此，比较水解前后旋光性的变化，也可以用以检识苷类化合物的存在。但必须注意，有些低聚糖或多糖的分子也都有类似的性质，因此一定要在水解产物中肯定苷元的有无，才能判断苷类的存在。一、氧化反应：单糖分子中有醛(酮)、醇羟基和邻二醇等结构，均可以与一定的氧化剂发生氧化反应，一般都无选择性。但过碘酸和四醋酸铅的选择性较高，一般只作用于邻二羟基上。以过碘酸氧化反应为例：过碘酸反应的基本方式：作用缓和，选择性高，限于同邻二醇、α- 氨基醇、α- 羟基醛(酮)、邻二酮和某些活性次甲基上，基本反应如下：(2) 糖的裂解(3) 作用机理：先生成五元环状酯的中间体。在酸性或碱性介质中，过碘酸以一价的H2IO5 －（水合离子）作用。结构式见书P73 。上述机理可以解释在弱酸或中性介质中，顺式1,2- 二元醇比反式的反应快得多，因为顺式结构有利于五元环中间体的形成。在连续有三个邻羟基的化合物中，如有一对顺式的邻羟基的，就比三上互为反式的容易氧化得多，故对同样的六碳吡喃糖苷，半乳糖和甘露糖苷的氧化速率比葡萄糖苷高。如书中P73 结构A,B,C 所示。二、糠醛形成反应：单糖的浓酸(4~10N) 作用下，失三分子水，生成具有呋喃环结构的糠醛类化合物。多糖则在矿酸存在下先水解成单糖，再脱水生成同样的产物。由五碳糖生成的是糠醛（R=H ），甲基五碳糖生成的是5- 甲糠醛（R=Me) ，六碳糖生成的是5- 羟甲糠醛(R=CH2OH) 。糠醛衍生物和许多芳胺、酚类可缩合成有色物质，可用于糖的显色和检出。如Molish 试剂是浓硫酸和α- 萘酚。苷键的裂解反应是一类研究多糖和苷类化合物的重要反应。通过该反应，可以使苷键切断，从而更方便地了解苷元的结构、所连糖的种类和组成、苷元与糖的连接方式、糖与糖的连接方式。常用的方法有酸水解、碱水解、酶水解、氧化开裂等。一、酸催化水解：苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解。反应一般在水或稀醇溶液中进行。常用的酸有HCl, H2SO4, 乙酸和甲酸等。反应的机理是：苷原子先质子化，然后断裂生成苷元和阳碳离子或半椅式的中间体，在水中溶剂化而成糖。以氧苷为例，其机理为：机理质子化脱苷元互变溶剂化脱质子由上述机理可以看出，影响水解难易程度的关键因素在于苷键原子的质子化是否容易进行，有利于苷原子质子化的因素，就可使水解容易进行。主要包括两个方面的因素：(1) 苷原子上的电子云密度(2) 苷原子的空间环境具体到化合物的结构，则有以下规律：按苷键原子的不同，酸水解难易程度为：N- 苷>O- 苷>S- 苷>C- 苷原因：N最易接受质子，而C上无未共享电子对，不能质子化。(2) 呋喃糖苷较吡喃糖苷易水解，水解速率大50~ 100倍。原因：呋喃环平面性，各键重叠，张力大。图(3) 酮糖较醛糖易水解。原因：酮糖多呋喃环结构，且端基上接大基团-CH2OH 。图(6) 芳香属苷（如酚苷）因苷元部分有供电子结构，水解比脂肪属苷（如萜苷、甾苷等）容易得多。某些酚苷，如蒽醌苷、香豆素苷不用酸，只加热也可能水解。即芳香苷>脂肪苷原因：苷元的供电子效应使苷原子的电子云密度增大。（8）N- 苷易接受质子，但当N处于酰胺或嘧啶位置时，N- 苷也难于用矿酸水解。原因：吸电子共轭效应，减小了N上的电子云密度。例：P79 朱砂莲苷酰胺注意：对酸不稳定的苷元，为了防止水解引起皂元结构的改变，可用两相水解反应。（例仙客来皂苷的水解P80 ）二、乙酰解反应在多糖苷的结构研究中，为了确定糖与糖之间的连接位置．常应用乙酰解开裂一部分苷键，保留另一部分苷键，然后用薄层或气相色谱鉴定在水解产物中得到的乙酰化单糖和乙酰