临床基因实验诊断质量管理规范新疆维吾尔自治区人民医院检验科王昌敏主要内容1.临床基因实验诊断工作规范；2.分析前质量管理规范；3.分析中的质量管理规范；4.分析后的质量管理规范。临床基因实验诊断工作规范1.实验室设置：分区原则：总面积不少于40 m2，分设四个独立有间隔的工作区；实验室配置：环境要求，标识及流动方向；消毒要求：消毒措施，范围，频率的规定；临床基因实验诊断工作规范2.实验室管理：制度：包括本实验室应制定的制度；仪器：完成本实验必须具备的仪器；人员：对人员的要求，包括学历，培训计划等；报告：对报告的发放，结果的保存，登记做出规定。分析前质量管理规范1.人员培训：由指定的机构培训，培训的内容，持证上岗，上岗证有效期三年；2.设置：人员：中级以上职称，持证上岗，定期接受再培训；环境：明示生物危害标识，不得随意出入，用品不得混用；设施：规定每个区的用途及分工；分析前质量管理规范文件：为保证检验质量，实验室必须建立《实验室管理制度》，《实验室各级人员岗位职责》，同时必须具备相应的实验室程序文件和标准操作程序（sop). 必须具备的sop 如下：分析前质量管理规范仪器设备的维护保养程序；仪器设备的校准程序；仪器设备的操作程序；实验室消耗品购买，验收和储存程序；试剂的质检操作程序；分析前质量管理规范临床标本的收集，运送程序；临床标本的处理（核酸纯化）程序；临床标本的保存程序；核酸扩增及产物分析检测的操作程序；实验室废弃物的处理程序；实验室的消毒，清洁程序；室内质量控制程序；抱怨处理程序。分析前质量管理规范仪器设备；四个区各有专用的实验设备，包括耗材，办公用品，有明显的标识，不得混用。试剂准备区：超净台，高速离心机，混匀器，冰箱，离心管架，加样器，消耗品，紫外灯，专用工作服和办公用品；样品处理区：超净台，高速冷冻离心机，混匀器，水浴箱或加热模块，加样器，消耗品，紫外灯，专用工作服和办公用品；基因扩增区：基因扩增仪，加样器，消耗品，紫外灯，专用工作服和办公用品；分析前质量管理规范4.产物分析区：加样器，消耗品，排风设备，紫外灯，专用工作服和办公用品，酶标仪，洗板机和恒温箱（采用PCR-ELISA 时) 或视检验方法不同而定。注：2—4区一定要用带滤芯的加样器吸头。分析前质量管理规范仪器的质量管理：档案，操作程序，仪器检定，仪器校准：加样器，热循环仪，水浴箱，高速冷冻离心机；4.实验方法的选择，评估；5.试剂的选择；根据使用目的，技术特点，经济情况，选择合格的试剂。分析前质量管理规范6.试剂的使用和准备：按要求存储，防污染；7.标本的准备：按要求建立相应sop，并对临床标本采集人员进行培训。特别注意：所采集的标本一定要正确，采集的时间要合适。分析前质量管理规范需要注意的环节：采集人员，采集部位，防污染措施，各种标本的采集和保存；标本的送检，标本的接收；分析中的质量管理规范1.建立检验项目的操作程序( sop)；项目名称；目的；标准（质控物）；实验条件；工作程序（包括室内质控）；结果判断。分析中的质量管理规范2.室内质控方案；核心：避免假阴性和假阳性。质控物：外加阴性和阳性质控对照；阴性对照：监测可能出现的污染；阳性对照：包括强阳性和临界（弱）阳性对照，一类是已知的阳性标本，另一类是已提取纯化的靶DNA 或cDNA，用于监测提取效率或扩增的有效性。分析中的质量管理规范质控方案及频度：1.定性实验：可采用试剂盒中的阴阳性确定标准来判定结果，每批实验都应该设一个已知临界阳性质控品，以判定结果的有效性；2. 定量实验：用已知拷贝数的阳性标准品系列同步检测每批必须带质控；纠偏措施；质控中有任一管出现问题，都应停止实验，找出原因并予以纠正；假阳性：产物污染或标本间交叉污染；假阴性：核酸提取，实验方法，试剂盒方面的原因。分析后的质量管理规范1.结果报告：报告单信息:实验室名称；检测项目；标本来源和状态；惟一标识；接收日期和检验日期；患者信息；检验方法；结果报告；检测者签名；负责人签名及日期。报告方式：定性：xx 检测项目检测阳性或阴性；；定量：阳性- xx 拷贝数/毫升；阴性-低于检测限分析后的质量管理规范2.数据管理：实验数据，原始结果，资料都应记录完整，有据可查。3.室间质量评价的规定：凡开展临床基因检测的实验室都必须参加室间质评；在室内质控的基础上参加室间质评；与病人标本同等对待；及时回报反馈，报表保存，保留原始记录。* *