●检定菌的传代检定菌传代次数不超过五代，从菌种保管中心获得的冷冻干燥的菌种为0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种至斜面琼脂为第1代，故企业的传代应从第二代开始，我们建议检定菌每月传代一次。检定菌传代支数为工作菌种+2 支，如新华药厂（以XH 代表新华）为例，第一次购入后的编号为XH0101 。其中XH01 代表新华药厂大肠埃希菌（大肠杆菌）的编号，后面01 为第一次购，第二次购进该菌种编号即为XH0102 。若工作菌种为2支，则每次传代4支。第一次传代，共传四支其编号为：XH01011 ，XH01012 ，XH01013 ，XH01014 。若选定XH01011 ，XH01012 为工作菌种，1个月后，对XH01013 ，XH01014 进行观察对比，选一支生长较好的XH01013* 为传代菌种。第二次传代，共传四支其编号为：XH010131 ，XH010132 ，XH010133 ，XH010134* 第三次传代，共传四支其编号为：XH0101341 ，XH0101342 * ，XH0101343 ，XH0101344 第四次传代，共传四支其编号为：XH01013421 ，XH01013422 ，XH01013423 ，XH01013424 ●检定菌的使用使用检定菌时，操作人员应按要求穿戴好工作衣帽、口罩，操作前后用肥皂洗手后，再用0.1% 新洁尔灭浸泡影2分钟。发生菌液或培养液污染台面或地面时，应立即以3% 来苏尔或5% 石炭酸等消毒液倾覆其上，半小时再进行洗涤。工作衣帽受到菌液污染时应立即脱去，经热压灭菌后洗涤。●废弃物处理废弃的培养物应经热压灭菌后洗涤，带菌的实验用品应浸泡于5% 来苏尔溶液中，24 小时后取出冲洗。效期已过的检定菌或检验后的带菌物品必须经过灭活处理后方可排入下水道。●注意事项（1）培养基的外包装若标明阴凉处储存，应在20 ℃以下保存。（2）培养基应按购入批号分批作培养基灵敏度试验，并做好记录。药典上有规定的，按药典规定方法操作；如未规定则在第一次做生测试验时，多做一支阳性对照，作为培养基的灵敏度试验。（3）2005 年药品检验操作规程P316 页讲到检定菌在4℃左右保存，我们认为不便操作，故还是要求在4-6℃之间保存。P325 页要求作微生物限度检查应有单独无菌室，每个无菌室应有独立的空气净化系统，企业可用通过全送全排、不回风来解决。P313 页要求缓冲间和操作室设置紫外灭菌灯（2-2.5W/M3 ），还要求定期检查幅射强度，要求在操作面上达到40μW/cm2 。我们认为此说法有待商榷，因为WHO 在1992 年对紫外线灭菌有明确规定：紫外线灭菌照射的高度小于2米，照射角度小于30 度，对需灭菌的对象照射时间应大于20 分钟。生测的无菌室背景为万级，空气在无菌室停留的时间为3 分钟，故本人认为，可以不设紫外灯。（3）剧毒试药管理●剧毒试药的种类剧毒试药指微量即可对人的健康或生命造成威胁的化学试药，检验用的剧毒试药常用的有砷盐（如As2O3 ）钡盐（如BaCl2 ），二价汞盐（HgCl2 ），氰化物（如KCN ）。●剧毒试药的购入检验室根据检验需要提出书面申请，由采购员按国家规定，严格按申请的数量购买。●剧毒试药的验收剧毒试药的验收由检验室2名负责保管人员进行验收，检查外观、包装是否完好，并核对品名、标签内容等是否正确。交接双方称其毛重，做好记录，双方签名。●剧毒试药的储存剧毒试药必须专柜（铁柜）存放，专帐记录，实行双人双锁保管。其配制试液亦应专人专柜上锁保管。●剧毒试药的发放领用剧毒试药必须由使用人填写“剧毒试药使用申请表”，经质检部门负责人批准后方可领用。剧毒试药称量时，先用称量范围在1000g ，最小感量为0.1g 的专用台称用减量法称取一个接近量（进位至0.1g ）。然后在千分之一的天平上精确称取使用量。剩余量（接近量—使用量=剩余量，剩余量小于0.1g ，最多量为0.099g ）不得倒回试药瓶中，应做销毁处理。●剩余量剧毒试药的销毁少量的氰化物用过量的硫代硫酸钠溶液处理后经下水道排出。少量的三氧化二砷用浓氢氧化钠溶液处理后用干水泥混合，用塑料袋密封后深埋。也可用碘溶液处理后经下水道排出。少量的氯化高汞用浓氢氧化钠溶液处理后经下水道排出。量大时可用干水泥混合用多层塑料袋密封包装后深埋。少量的氯化钡用过量的稀硫酸处理后经下水道排出。4 、留样观察●留样观察概述（1）留样观察的重要性留样观察是药品生产企业质量管理工作中的一项重要工作。通过留样观察可以对产品质量的稳定性作进一步的考察，为改进工艺，改进药品包装，确定药品贮存条件和运输条件，确定药品有效期，提供科学依据，同时也为药品在流通环节出现质量纠纷时提供可靠的依据。●药品GMP 证书有效期到期申请再认证的规定《药品GMP 证书》有效期限期满的药品生产企业，应按规定向省级食品药品监督管理局或国家食品药品监督管理局提出药品GMP 认证申请。国家食品药品监督管理局规定：由国家颁布的有效期为一年的《药品GMP 证书》，期满后仍由国家食品药品监督管理局负责认证；由国家局颁发的有效期为五年的《药品GMP 证书》，期满后按药品GMP 两级认证办法进行，即由国家局负责认证的剂型，向国家食品药品监督管理局提出申请；由省局负责认证的剂型，向省级食品药品监督管理局提出申请。原国家局颁发的《药品GMP 证书》认证范围如即有注射剂、放射性药品、国家规定的生物制品，又有其它制剂的企业，期满后可以一并按程序向国家食品药品监督管理局提出申请。如分别向国家食品药品监督管理局和省级食品药品监督管理局提出申请的需在向国家食品药品监督管理局申请药品GMP 认证的申请表中注明。●关于GMP 认证环保、消防的要求为保证药品GMP 质量、保护生态环境，国家食品药品监督管理局决定：药品生产企业的环境保护、废气废水排放、安全消防等须符合国家有关法律规定，所取得的有关合格证明、证书和标志，须列入药品GMP 管理文件中。企业在申请药品GMP 认证时，有关证明、证书和标志复印件应随申报资料一并上报。●关于选派观察员的要求药品GMP 认证现场检查观察员应是地市级以上药品监督管理部门选派的药品监督管理人员；检查疫苗车间，观察员应是省级药品监督管理部门人员。观察员代表当地药品监督管理部门，与药品GMP 检查组协调和联络有关工作，现场检查中如发现企业有违背《药品管理法》及相关规定等问题，检查组应通过观察员及时移交所在地省级食品药品监督管理局查处，并在检查报告中说明有关情况。●关于推进中药饮片等类别药品监督实施GMP 的工作（1）依据《药品管理法》及有关规定，为加强中药饮片、医用气体、体外诊断试剂的生产监督管理，国家食品药品监督管理局决定推进中药饮片、医用气体、体外诊断试剂等类别药品监督实施GMP 工作。自2006 年1月1日起，所有按药品管理的体外生物诊断试剂生产企业必须在符合GMP 的条件下生产；自2007 年1 月1日起，所有医用气体生产企业必须在符合GMP 的条件下生产；自2008 年1月1日起，所有中药饮片生产企业必须在符合GMP 的条件下生产。届时对未在规定期限内达到GMP 要求并取得《药品GMP 证书》的相关中药饮片、医用气体、体外生物诊断试剂生产企业一律停止生产。（2）自2005 年1月1日起，各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局，负责对辖区内的中药饮片、医用气体生产企业的GMP 认证工作；体外生物诊断试剂的认证工作继续由国家食品药品监督管理局负责。其中中药饮片规定如下：①核发中药饮片《药品GMP 证书》时，其认证范围应注明含毒性饮片、含直接服用饮片及相应的炮制范围，包括净制、切制、炒制、炙制、煅制、蒸制等。②原“直接入药（包括口服、用于非创伤面）中药饮片”现明确为“直接口服的中药饮片”。直接口服的中药饮片其粉碎、过筛、内包装等生产厂房，应符合三十万级洁净区要求。③毒性饮片的生产应有专用生产线，并在生产过程中注意安全防护。生产毒性饮片的企业应有当地环保部门出具的符合要求的相关证明文件。应进一步加强对仓储面积、设施的要求，需在阴凉库贮存的中药材、中药饮片，阴凉库面积应与生产规模相适应。⑤露天凉晒问题应坚持“炮制后中药饮片不可露天干燥”。⑥工艺规程。中药饮片生产企业由于生产的品种较多，且各种炮制方法的生产工艺一致性相对统一，主要区别在工艺技术参数。故中药饮片生产企业的工艺规程可按炮制方法制定出制法通则，但每个品种应有各自的特殊规定，如；生产过程中的技术参数要求，原料、中间产品和成品的质量标准等。⑦委托检验问题。企业应严格按国家标准对中药材和中药饮片进行全检，并具备检验用仪器。但气相色谱仪由于操作很难掌握，且稳定性较差，可委托具有检验资质的单位完成相关项目的检验。其中医用气体规定如下：①医用氧改为医用气体。因目前的医用氧检查项目条款实际上涵盖了其它医用气体的检查条款，如将涉及医用的其他气体均包含在内，可以不必对其他医用气体再制定GMP 评定标准，对个别气体有特殊要求的可单独列出。②医用氧应分为液态、气态。因实际存在只生产液态或气态氧的企业，其生产条件完全不同，故建议在括号内注明。③因国家质量技术监督局已不允许有委托钢瓶，故强调企业必须有与生产能力相适应的自有气瓶，并只能充装自有气瓶。④生产批号的划分原则：企业可按各自的情况规定为：以一槽车为一批（液氧）；以储罐为一批（液氧）；以一天分装量为一批（气态氧）。生产批号必须做到可追踪。⑤因钢瓶的有效期为3年，医用气体的有效期不得大于钢瓶有效期。●关于推进放射免疫分析药盒实施GMP 的工作自2006 年1月1日起，所有放射免疫分析药盒生产企业必须在符合GMP 的条件下生产。届时对未在规定期限内达到GMP 要求并取得《药品GMP 证书》的放射免疫分析药盒生产企业一律停止生产。放射免疫分析药盒GMP 认证工作由国家食品药品监督管理局负责。●药品GMP 飞行检查暂行规定飞行检查是跟踪检查的一种形式，指事先不通知被检查企业实施的现场检查。其核心是突然性，目的是核查企业药品生产质量管理方面的即时状况或真实情况。（1）飞行检查范围：飞行检查范围主要为被举报的企业、有不良记录企业和无菌药品生产企业。（2）飞行检查员选派：选派能够坚持原则、精通业务、廉洁公正的资深检查员2-4 人组成检查组实施飞行检查。（3）省级食品药品监督管理局应选派得力人员作为观察员协助飞行检查组实施检查。（4）飞行检查的组织实施应注意保密原则，对举报的，应注意保护举报人。（5）飞行检查的所有工作程序应加急处理，所有文件按加急件办理。（6