保健食品安全性毒理学检验及评价仲伟鉴上海市疾病预防控制中心第一部分特点具有特定的保健功能；无毒副作用，食用安全；有别于食品和药品；增强体质、预防疾病为主；适用于特定人群。特定功能由国家管理部门指定允许申报的功能目前有27 种27 种以外的功能，生产企业在获得足够的技术资料后（包括评价方案，试验数据及结果）向有关管理部门提出受理申请，接受评审。特定人群正常成人以外，包括婴幼儿、孕妇、乳母、青少年、中老年、特殊工种的工作者以及常见病病人对于营养保健有特殊的需要膳食结构的不同营养素需求的不同根据新的疾病谱和健康问题，开发新的保健功能根据新的养生保健概念，开发新的保健功能根据现代营养科学理论，开发新的膳食有效成分根据中医药理论，开发中药类有效成分根据生命科学理论，开发新的人体所需营养素中草药新资源野生动植物及其产品核酸类真菌类益生菌类酶制剂、氨基酸螯合物、金属硫蛋白以及直接以微生物发酵的第二部分主要内容检验评价依据审评基本要求选择毒理学试验的基本原则实验动物的选择样品的预处理原则毒理学试验项目要点介绍毒理学安全性评价时应考虑的问题审评结论的判定审评的基本要求1. 配方原（辅）料、用量、理化性质2. 剂量食用方法及用量3. 工艺规格化产品符合配方、工艺、质量标准4. 批号注意批号是否一致,益生菌、奶制品等保质期短的除外选择毒理学试验的基本原则选择毒理学试验的基本原则2. 一般无需进行毒性试验的原料或成分 属于普通食品和卫生部规定的药食同源的物质：采用传统的工艺及食用方式水提取物，常规服用量，无不安全性报道来源、工艺和质量符合国家要求的营养强化剂或营养素补充剂选择毒理学试验的基本原则3. 需进行一阶段和三项致突变毒性试验的原料或成分属于普通食品和卫生部规定的药食同源的物质且用水提以外的其它常用工艺生产的：（1）服用量与常规用量相同急性毒性、三项致突变试验（2）服用量大于常规用量还需加做30 天喂养试验，必要时进行传统致畸试验和第三阶段毒性试验选择毒理学试验的基本原则4. 需进行一、二阶段毒性试验的原料或成分文献显示无危害，人群长期食用；具有国际性毒理学评价结果的已知的化学物质，产品质量规格与国外产品一致；国外广泛食用且能提供安全性评价资料；卫生部规定允许使用的动植物及其提取物或微生物。选择毒理学试验的基本原则5. 需进行一至三阶段毒性试验的情况：一、二阶段试验结果与国外产品不一致的国外少数国家或地区食用的原料或成分水提取物，大于常规服用量用水提以外的其它常用工艺生产的，大于常规用量选择毒理学试验的基本原则6. 需进行一至四阶段毒性试验的原料和成分 国内外均无食用先例7. 敏感指标及敏感试验的保健食品 不同食用人群和（或）不同功能的保健食品选择毒理学试验的基本原则8. 保健食品新原料保健食品新原料（以下简称新原料）是指不在国家食品药品监督管理局公布的可用于保健食品、卫生部公布或批准可以食用以及生产普通食品的范围内，拟用于保健食品的原料。国家食品药品监督管理局和国家有关部门规定的不可用于保健食品以及禁止使用的物品，不得作为新原料。选择毒理学试验的基本原则在已批准的保健食品中使用过，或卫生部已批准为新资源食品的原料，符合以下情况的仍按新原料进行管理：未列入国家食品药品监督管理局公布的可用于保健食品的物品名单；尚未列入卫生部公布或批准的食品新资源或新资源食品名单内；卫生部已批准为食品新资源或新资源食品，但保健食品注册申请人与食品新资源或新资源食品生产批件中载明的申报单位不一致。选择毒理学试验的基本原则新原料安全性毒理学试验项目的选择①无食用史需做四阶段试验②局部地区有食用史需做三阶段试验其中，100 倍<摄入量<300 倍需做第四阶段试验③有食用史需做二阶段试验经评价后下一阶段试验④广泛食用的原料二阶段试验（食用史包括地区、年代、人群、食用量、频率等情况）选择毒理学试验的基本原则新原料安全性毒理学试验项目的选择⑤已知化学物: ⑤-1 可只做二阶段实验的包括已有权威机构进行系统的毒理学安全性评价有资料证明所用原料与其一致⑤-2 如试验结果与权威机构进行的评价不一致，需进入下阶段的试验⑥有新原料的保健食品: 根据试验结果综合分析。实验动物的选择及给样量1. 根据各项实验的具体要求，合理选择实验动物常用大鼠和小鼠，品系不限，推荐使用近交系。2. 动物应符合《实验动物管理条例》清洁级或清洁级以上动物合格证号及动物实验室合格证号3. 灌胃量大鼠：10 ml/kg BW （若以水为溶剂，推荐20 ml/kg BW ）小鼠：20ml/kg BW 审评结论的判定1. 认可毒理学试验：试验设计合理，操作规范，试验结果能够证明受试物的安全性。2. 属以下几种情况之一，补充资料后建议批准：（1）检验报告格式不规范，需要重新出具检验报告毒理学试验报告。（2）数据偏离历史对照较大，需检验机构做出解释。（3）未提供某些试验数据，需要补充提供。审评结论的判定3. 重做试验，大会再审，属以下几种情况之一：（1）由于实验操作不规范，根据提供的检验报告无法评价产品的安全性，需要做除30 天/90 天喂养试验以外的毒理学试验；（2）已有数据提示可能存在安全性问题，但难以下结论，需要重复试验。（1）毒理学评价的结果表明产品在推荐剂量下对人体具有一定的毒性，存在安全性问题。（2）产品的原料、配方存在明显的安全性问题，如配方含有“可用于保健食品的原料”名单以外的原料，且未进行新资源食品安全性毒理学评价。（3）选择安全性毒理学试验不符合程序规定，未完成相应阶段的毒理学试验。（4）毒理、功能、兴奋剂与卫生学、稳定性试验样品的批号不一致。（5）未按规定提供安全性毒理学评价资料的。（6）30 天/90 天喂养试验剂量设计不合理或某些指标异常，结果不可信。第三部分存在的问题鉴于制订此程序的历史背景与目前情况有所不同，因此，对保健食品的安全性评价时，出现了选择毒理试验的项目、剂量、样品前处理等问题，现就上述问题一并提出供讨论。存在的问题充分了解受试物1. 要求提供规格化产品，至少是中试产品。符合既定的配方，生产工艺和质量标准。2. 仔细阅读配方以了解受试物的物理、化学性质（包括化学结构、纯度、稳定性等）。3. 了解生产工艺。4. 按产品说明书的最大人体推荐量进行剂量设计。存在的问题动物年龄主要指30 天和90 天喂养试验，“程序”中规定用离乳大鼠，而保健食品应视具体情况而异。最典型的是人参、鹿茸、减肥产品，并非受试物本身有毒影响了动物的生长发育，而是因为这类产品的服用对象是成人，所用的动物是离乳大鼠。存在的问题实验项目的选择配方中含有仅限局部地区人群食用而又不在“51 号”名单上的原料，只对产品进行了两阶段毒理试验，而未对原料本身按要求进行毒理学评价，有的进行了评价但给予动物受试物的方式与实际食用方式不一样，如袋泡茶掺在饲料中给予动物。含“51 号”文附录二名单上原料的产品只做了LD50 和三项致空变试验。存在的问题实验项目的选择药食同源产品经有机溶剂提取未做毒理试验，或只做LD50 和微核试验。从食品中提取某一成分的粗提物只做了LD50 和三项致突变试验，如大豆异黄酮。配方中仅有单一成分，如人参、西洋参、蜂王浆不必进行全部二阶段毒理试验。存在的问题样品前处理（一）液体类（二）酒类（三）固体类（四）菌类（五）以某些食品为载体的保健食品：如富含微量元素的鸡蛋、南瓜粉等存在的问题LD50 中存在的问题1. 经口LD50 还用对照组。2. 不写禁食时间。3. 做到了21.5g/KgBW, 结论是﹥10g/KgBW 。4. 将受试物掺入饲料吃24 小时。存在的问题Ames 实验1. 以油为载体的产品直接倒入平皿2. 工艺是低温提取或低温冷冻干燥的产品用8磅15 分钟高压灭菌。3. 有溶剂对照而无自发回变对照。4. 菌落回变数随剂量的增加而增多已超过正常值而不是二倍而出具了合格的报告存在的问题Ames 实验5. 有抑菌作用的产品不进行预试验找出抑菌剂量而出具了5mg/ 皿菌落回变数正常的报告。6. 产品中明显含有组氨酸，而不进行除组氨酸的前处理。7. 应该用XAD-2 树脂对样品进行前处理8. 没有理解5mg/ 皿含义：系指有效成份，如某些产品含有80% 的糖，没进行样品前处理或向送样方提出要求，直接用产品做5mg/ 皿，实际上是1mg/ 皿。存在的问题微核、精子畸形以及睾丸染色体畸变试验1. 微核试验：几份报告中都有阳性对照的数据，而这几份原始记录中皆无阳性对照。2. 精子畸形试验：阳性对照组精子畸形率﹤3.4% ，即判断阴性对照组与阳性对照组相比差异有显著性P﹤0.05 。（正常畸形率为0.8-3.4% ）。3. 睾丸染色体畸变试验：阳性对照持续应用一年以上。存在的问题30 天或90 天喂养实验1. 雌性鼠的体重比雄性鼠还重或一样重存在的问题30 天或90 天喂养实验2. 食物利用率雌雄分不开，或为将雌、雄性大鼠食物利用率拉开差距，雌性和雄性大鼠的进食量基本一致。3. 大鼠的进食量越来越高，雌性大鼠700 多克、4. 雄性大鼠600 多克，而体重与食物利用率和以前的差不多。5. 剂量设计：相当于推荐量（以g/Kg BW 计）的6.56 、26 和105 倍，这是先设计再做试验，还是先做试验再设计？6. 受试物掺入饲料的量高达18% ，袋泡茶掺入饲料给予动物。存在的问题30 天或90 天喂养实验7. 动物摄入饲料的量在30 天喂养试验以体重的10% 计，90 天喂养试验以体重的8% 计，这是经过大量资料统计得出，但将受试物以10-20% 的浓度饮水给予动物，又不计饮水量，与报告的剂量设计是否基本一致？有的按每100gBw 给10ml 含有受试物的水，饮毕再给饮用水？8. 有的试验动物体重增长缓慢，解释是受试物不好吃。9. 生化指标：不做TG 、AST ；TC 高达2.8mmol/L ；BUN12.9mmol/L 。存在的问题30 天或90 天喂养实验10. 以大鼠为试验动物测尿酸，大鼠的代谢与人不完全一样，可将尿酸转化为尿囊素排出。11. 病理报告：心肝脾无毒性损伤，两个产品，两份报告来自同一检测单位；A4 纸写了一大篇，详细描述了病理组织结构，没有一点异常，四个产品、四份报告来源同一检验单位；写一小段也比较详细的描述了病理组织结构，亦无任何异常三个产品、三份报告亦来源于同一检验单位。存在的问题传统致畸试验其剂量设计比30 天喂养还高，程序已明确以亚急性试验的最大无作用剂量为高剂量，目的是：找强致畸