常规知识和基本操作临床检验中心一、血液常规检查从接到申请单到报告单发出（一）毛细血管采血与标本的检测1 、毛细血管采血：需血量＜0.1ml 的检测项目—- 血细胞计数、血红蛋白测定、血液涂片等的采血。[ 采血部位] 成人：我们用静脉采血儿童：一般用手指----- 左手无名指或中指指尖内侧为宜。半岁以下的婴儿：若手指太小，可用足跟或拇指。[ 采血针] 一次性专用采血针。使用时一人一针。避免传染病的交叉感染[ 采血方法] ①按摩：首先用手指按摩采血部位，使其充血。②消毒：用碘伏消毒皮肤，用两支无菌干棉签蘸碘伏消毒两次。③刺针：待消毒液自然蒸发干或消毒时间到后用干棉签擦干，用左手拇指和食指固定采血部位，蹦紧局部皮肤，右手将一次性专用采血针迅速刺入皮肤，深约2—3mm ，立即出针，血液自行流出。（一）毛细血管采血与标本的检测如血流不畅，可于刺针点远端的四周向内稍加压力，切忌在刺针点近处用力挤捏，以免组织液混入血中而影响检验结果。④吸血：用消毒干棉签擦去第一滴血，用一次性微量吸管吸取20μl 血液，擦去管外余血，然后将血液吹入预先准备好的稀释液中，用上清液冲洗吸管2—3 次，混匀。同时推血片。⑤止血：采血完毕后，用消毒干棉签在针刺伤口处压迫止血。[ 注意事项] ①采血部位②严格消毒皮肤并擦干③多项检查时采血顺序④流血不畅时⑤出血不止时（一）毛细血管采血与标本检测2 、标本的检测门诊化验室、急症化验室：机器是KX—21 ，静脉血和毛细血管血双通道，测定时应先选择模式，待机器显示可以测定时，开始检测。检测完毕，输入病人资料，打印报告单。南院：机器是F-800 ，WBC 、RBC 检测双通道，稀释器稀释管测RBC 和PLT ，原采血管加2—3 滴溶血素，混匀待溶血后检测WBC 和HGB 。北院：F –820 [ 检测注意事项] （1）混匀（2）加溶血素后放置时间不要过长，否则，不分类。（二）静脉血采血与标本检测1、静脉采血：需血量＞0.2ml 的检测项目—血细胞比容、ESR 测定、凝血因子测定，各种生化项目等，均需用静脉采血。[ 采血部位] 通常采用肘前静脉。当肘前静脉不明显时，可采用手背静脉或踝部静脉。婴幼儿可采用颈外静脉。[ 采血器材与消毒液] 采血器材：注射器、试管、垫巾等为一次性，压脉带用一次即消毒处理后再用。消毒液：碘伏[ 采血方法] 1 ）准备：先按检验项目要求，准备好相应的器材，如注射器、抗凝管、一次性试管等。若同时有其它检测项目，一针抽出，如有需空腹抽血的，要询问是否吃饭，另外，对害怕者需作适当安慰。以肘前静脉采血为例，患者手臂伸直平放床边或台面垫枕上，暴露穿刺部位。（二）静脉采血与标本检测2 ）扎压脉带：找好采血静脉后，在上臂扎上压脉带。3 ）消毒：用两支棉签蘸碘伏，于欲穿刺皮肤处从内向外做顺方向环形消毒两次。4 ）刺入静脉：取一次性注射器（注意包装是否封闭，有无过期），使针头斜面和针管刻度向上，嘱病人握紧拳头，使静脉显露。左手拇指固定穿刺处下端，右手持穿刺针，先以约30O 角度沿静脉正面进针，快速刺入皮肤，然后降低角度刺入静脉腔，见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针头滑出血管。5 ）抽血：右手固定注射器，左手缓缓抽动注射器内芯，抽至所需血量。6 ）松压脉带：嘱患者松拳，松开压脉带。7 ）拔针止血：以无菌棉签压住穿刺处，快速拔出针头。8 ）注入试管：血RT 、ESR 、血凝等的专用管，不取针头，直接将针（二）静脉采血与标本检测头从特制管帽的中心刺入，注入规定的血量，轻轻颠倒混匀8次；其它检查，先取下针头，将血液沿管壁缓慢注入一次性试管或其它容器内，待自行凝固，再分离血浆。9 ）核对编号：采血完毕，应再次核对患者姓名与血标本编号，并立即将注射器的针头放入专用一次性桶，针栓放入黄色医疗垃圾袋桶。[ 注意事项] 1 ）采血前应向患者作适当的解释,以消除其不必要的顾虑和恐惧心理。如遇个别晕针患者,应立即拔出针头,让其平卧休息片刻即可恢复.如有其他情况,应立即找医生共同处理。2 ）消毒皮肤应严格按正确方法进行,在采血过程中应严格无菌操作。3 ）进针时，深度、角度要适宜，用力不能过猛，以免刺穿血管造成皮下血肿。如发生此情况，应嘱咐患者事后要热敷，促进吸收。（二）静脉采血与标本检测4 ）避免溶血。采血容器不干燥，压脉带捆扎时间太长，穿刺不顺损伤组织过多，抽血速度过快，血液注入容器时未取下针头或抗凝时过分振摇等，均可造成标本溶血。5 ）抽血时，只能外抽，不能内推，以免空气注入静脉形成气栓，造成严重后果。2 、标本的检测：仪器均为五分类如果仪器处于休眠状态，按绿键启动。在机器处于可检测状态下，将已采集的血标本轻轻颠倒混匀数次，同时仔细观察血液是否有凝块，然后开始检测。3 、常用抗凝集：血RT—EDTA—K2 ESR—浓度为0.106mml/L 的枸橼酸钠血凝—浓度为0.109mml/L 的枸橼酸钠大部分生化项目—肝素（三）结果观察血常规结果测出，工作仅完成一部分。1 、结果的观察：首先要知道血常规各项的正常范围序号英文缩写项目名称结果单位参考值1 WBC 白细胞109/L 4.0—10.0 2 RBC 红细胞1012/L 3.50—5.50 3 HGB 血红蛋白g/L 110—160 4 HCT 红细胞压积% 37.0—49.0 5 MCV 平均红细胞压积fl 82.0—92.0 6 MCH 平均红细胞血红蛋白含量pg 21.0—31.0 7 MCHC 平均红细胞血红蛋白浓度g/L 320—360 8 RDW-SD 红细胞分布宽度fl 37.0—54.0 9 RDW-CV 红细胞变异系数% 0.0—14.1 10 PLT 血小板109/L 100--300 (三)结果观察11 PDW 血小板分布宽度fl 9.0—13.0 12 MPV 血小板平均体积fl 9.0—17.0 13 P--LCR 大血小板比率% 10.0—30.0 14 NE# 中性粒细胞109/L 2.00—7.50 15 LY# 淋巴细胞109/L 0.80—4.00 16 MO# 单核细胞109/L 0.12—0.80 17 EO# 嗜酸性粒细胞109/L 0.05—0.50 18 BA# 嗜碱性粒细胞109/L 0.00—0.10 19 NE% 中性粒细胞% % 50.0—75.0 20 LY% 淋巴细胞% % 20.0—40.0 21 MO% 单核细胞% % 3.0—10.0 22 EO% 嗜酸性粒细胞% % 0.5—5.0 23 BA% 嗜碱性粒细胞% % 0.0—1.0 (三)结果观察2、WBC 、RBC 、PLT 结果偏低或偏高都要推片、染色、镜检，或者稀释后手工计数。白细胞分类异常或不分类，都要推片、染色、镜下手工分类。RBC 、HGB 、HCT 、MCV 、MCH 、MCHC 对比观察。其数值的变化与贫血的关系。大专教材：P34 中专教材：P54 3 、报告单经老师审核，双签名后方能发出。二、尿液检验从接到申请单到报告单发出1、接到申请单，根据申请检验项目给病人盛标本的容器，并告知怎样接标本，接多少。[ 标本的种类] 晨尿、随时尿、餐后尿、定时尿标本、培养用尿。[ 收集标本的容器要求] 1 ）送检尿标本的容器上要有标签，并注明患者姓明、科别、床号、应用药物（Vit c ）、收集标本的时间及检测项目。2 ）容器一次性使用、清洁、干燥，不含干扰实验的物质。培养用无菌瓶。3 ）容器至少容纳50ml 尿液标本，开口大于4cm ，底部要宽。4 ）婴幼儿用特殊容器。二、尿液检验从接到申请单到报告单发出2、收标本：1 ）下病房收标本：检查标本是否合格，核对容器标签及标签填写内容与申请单是否相符，查对无误后编号。2 ）在门诊收标本：检查标本是否合格，询问留取标本的时间，查对无误后编号，同时，对门诊病人告知取报告单时间，病房的，让其送标本者先回去，检验结果统一送所在科室。对尿液标本留取时间超过2h 、标本量常规检查不足10ml 等不符合要求的标本，说明理由拘收。3 、标本检测：1 ）记录尿液理学性质。2 ）干化学检测：注意蘸条时间，每半分钟测一个，但对每一个标本从蘸条到打印完结果是1分钟。二、尿液检验从接到申请单到报告单发出3 ）标本的离心、涂片、镜检：离心：10ml 刻度离心管、10mL 新鲜混匀尿、RCF378g （16cm 半径，1500 转/分钟）、离心5分钟。涂片、镜检：弃去上清夜，留沉渣0.2ml ，混允，取20μl 于载玻片上，用18×18mm 盖片覆盖后镜检。4 、报告单的审核：1 ）结果观察——尿11 项pH ：变色范围为pH4.5—9.0 ，可监控尿pH 变化对尿蛋白和相对密度测定的质量。PRO ：正常人的蛋白质＜100mg/L ，均呈阴性反应（黄色），当增至150—250mg/L 时，可呈阳性反应（颜色由绿色，进而为蓝色）,对清蛋白反应敏感，对球蛋白反应很弱，其敏感度为清蛋白的1/50 左二、尿液检验从接到申请单到报告单发出右。当患者服用磺胺嘧啶和喹啉等药物引起强碱性尿（pH ＞8）时，超过了试带模块中缓冲剂的缓冲能力，无论尿中有无蛋白质均产生假阳性反应。大剂量青霉素可使结果减弱。GLU ：葡萄糖氧化酶反应原理。特异性高，不受乳糖、蔗糖、果糖、麦芽糖等影响。高浓度的酮体、Vc 可使反应减弱甚至呈假阴性。灵敏度受尿相对密度值和温度影响，浓缩尿降低灵敏度，室温升高提高灵敏度。试带为含酶制品，注意防潮、防高温，否则酶失活而呈假阴性。KET ：对乙酰乙酸的检测灵敏度为0.05—0.10g/L ，对丙酮为0.4—0.7g/L, 不于β- 羟丁酸反应。尿液标本要新鲜，及时送检，以免丙酮挥发造成假阴性或阳性反应减弱。糖尿病酸中毒早期病例主要酮体是β- 羟丁酸，乙酰乙酸很少或缺乏，此时测酮体总量减少，在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后，乙酰乙酸含量比初始急性期含量高。二、尿液检验从接到申请单到报告单发出BLD ：灵敏度HGB 150 μg/L 、RBC 5—10 个/ μl 。本试带能与血红蛋白、肌红蛋白反应，试带模块上产生全面绿色表示血红蛋白存在，呈花斑状提示有位溶解RBC 存在。正常人尿中有时可有少量RBC ，可出现“+”结果。假阳性：尿中某些不耐热的酶、肌红蛋白、菌尿。镜检对照，加热煮沸后再检测。假阴性：高浓度的Vc BIL ：灵敏度为5mg/L 。尿液必须新鲜，否则，在阳光照射下，胆红素氧化为胆绿素，可致反应减弱或假阴性。高浓度的Vc 可致反应减弱或假阴性。当患者接受大量氯丙嗪（镇静剂）治疗、或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶（泌尿道止痛药）代谢产物时可致假阳性反应。URO ：检测灵敏度2—10mg/L 。二、尿液标本从接到申请单到报告单发出NIT ：阳性结果提示菌尿存在——泌尿道革兰阴性杆菌感染，一般是大肠埃希菌。本反应阴性不能排除菌尿存在。其原因①菌尿如在膀胱中储留不足4h ，不能产生足够的亚硝酸盐；②致病菌—球菌、真菌或支原体等不产生将硝酸盐还原成亚硝酸盐的酶。SG ：此试带的测试范围为1.010—1.030 ，当尿SG 值高于1.030 时，将尿液稀释至1/2